助力肝炎精准诊断——定量、分型、耐药突变分析一网打尽

病毒性肝炎 (Virus hepatitis) 是由不同的肝炎病毒引起的、以肝脏损害为主的传染病。根据病原学诊断,可引起病毒性肝炎的病毒主要包括甲、乙、丙、丁、戊五种病毒型,分别引起甲、乙、丙、丁、戊型病毒性肝炎。

 

其中乙型、丙型和丁型这三种类型的慢性肝炎感染,占肝炎死亡人数的95%以上,是全球努力消除的重点。因此,肝炎病毒感染的早期诊断对于后期的有效治疗及护理十分重要。

 

病毒性肝炎诊断检测为最常见的检测项目之一,主要涉及的检测方式包括生物化学、免疫学及分子生物学方法。基于分子生物学方法的检测,可对病毒性肝炎进行病毒核酸定量、病毒分型及其耐药突变检测等分析,对于精准诊断、用药疗效及诊疗方案的指导等具有重要意义。

 

 

Volcano3G® 系列

双功能酶即用型全预混液,极耐高温特性为精准诊断助力

病毒性肝炎病原体包括DNA和RNA病毒,Volcano3G®基于核心的双功能单酶,兼具DNA聚合酶和反转录酶活性,且无需使用锰离子的激活,可同时读取DNA和RNA模板 (图1)。为各类型病毒性肝炎精准诊断提供高效解决方案。

 

图1.Volcano3G®核心双功能酶,可适用于

DNA和/或RNA模板的扩增及检测

— Volcano3G®核心双功能酶,可扩增并检测DNA模板

— Volcano3G®核心双功能酶,可扩增并检测RNA模板

-- 普通Taq聚合酶,可扩增并检测DNA模板

-- 普通Taq聚合酶,无法扩增并检测RNA模板

(引用文献:Johannes W. P. Kuiper, Timo Baade, et al. Detection of SARS-CoV-2 from raw patient samples by coupled high temperature reverse transcription and amplification. PLoS One. 2020 Nov 2;15(11):e0241740.)

 

Volcano3G®极高的耐热性 (95℃半衰期>40min) 可设置至70°C或更高的反转录温度,在RT-qPCR反应过程中有助于减少靶基因中形成的RNA二级结构,提高检测特异性及灵敏度 (图2),为病毒性肝炎精准诊断提供更优性能的解决方案。

 

图2. Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix (#6101) 高温反转录RT-qPCR反应 (70°C反转录温度),和其他供应商常规一步法RT-qPCR反应 (50°C反转录温度) 灵敏度及性能表现

 

货号

产品名称

规格

#6101

Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix

100/500 reactions

#6301

Volcano3G® RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye)

100/500 reactions

 

 

Plextaq® 系列

强耐抑制性多重检测,适用基因分型诊断

PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix 即用型预混液中,以独特的Taq DNA聚合酶和经优化的缓冲液组成,表现出很强的耐受性。我们验证了以血液为样本的耐受能力表现,并以三个基因为靶点,进行探针法多重分型检测 (图3),结果显示PlexTaq®对于处理复杂类型样本具有很强的耐受能力,更加省时、省力,适用于基因分型诊断。

 

图3. PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix 对不同浓度血液类型样本进行基因分型检测

 

货号

产品名称

规格

#4000

PlexTaq® 5x qPCR  Multiplex Master Mix

100/500 reactions

#1101

Taq Hotstart DNA Polymerase

400/4000 U

 

 

 

HiDi® 系列

高效鉴别能力,耐药突变分析更轻松

HiDi®系列使用具有高鉴别能力的工程化DNA聚合酶适用于高度选择性的PCR等应用,如在高野生型背景下的突变检测中,可在104或更多野生型基因拷贝中检测出小于10 个拷贝的突变。以ARMS-PCR的应用为例,HiDi®对于引物3' 端仅一个核苷酸错配,无论是转换或颠换型错配均可高效鉴别 (图4),为肝炎耐药突变分析检测的各类方法建立提供更高效的解决方案。

图4. HiDi® Taq DNA Polymerase同其他供应商于ARMS-PCR的应用表现

 

货号

产品名称

规格

#4200

HiDi® Taq 2x PCR Master Mix (探针法)

100/500 reactions

#9201

HiDi® Taq DNA polymerase (探针法)

250/1000 U

#9101

HiDi® 2x PCR Master Mix (染料法)

100/500 reactions

#9001

HiDi® DNA polymerase (染料法)

250/1000 U

 

 


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