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——零步法RT-PCR检测

对于RNA样本检测，常规传统的一步法检测，需要依赖于单独的逆转录酶先进行反转录、完成cDNA合成后，再启动DNA聚合酶活性、进入循环扩增环节，整个反应过程耗时相对较长，需要双酶协同工作，对于体系优化具有一定挑战。
Medix Biochemica重磅推出双功能重组酶预混试剂——Volcano3G^®，具有高达95℃的热稳定性，兼具逆转录酶和DNA聚合酶活性，实现零步RT-PCR、粗样本直扩检测。

双管齐下

兼具逆转录酶和DNA聚合酶活性

Volcano3G^®预混试剂中，采用的工程化重组Taq DNA聚合酶，兼具逆转录酶和DNA聚合酶活性，可同时实现反转录cDNA的合成和DNA扩增，真正实现零步法RT-PCR检测。

Volcano3G^®中使用的兼具逆转录酶活性的双功能 Taq DNA聚合酶，适用于RNA和/或DNA模板的检测(蓝色实线          、黄色实线          )，而普通Taq DNA聚合酶，仅适用于针对DNA模板的扩增检测(黄色虚线.......)，不能进行RNA反转录(蓝色虚线.......)。

引用文献：Johannes W. P. Kuiper, Timo Baade, et al. Detection of SARS-CoV-2 from raw patient samples by coupled high temperature reverse transcription and amplification. PLoS One. 2020 Nov 2;15(11):e0241740.

Volcano3G^®快速零步法 RT-PCR，相较于传统一步 RT-PCR，节省了15+5 min单独逆转录和预变性过程，极大程度缩短了检测时间。

稳健如飞

零步法RT-PCR检测，缩短反应时间，支持粗样本直扩

Volcano3G^®基于适配体修饰热启动酶配方，支持在高温条件下即时启动循环，无需单独的样本提取步骤，实现粗样本直接扩增，并且在双功能工程化酶的作用下，极大程度缩短检测时间。

烈火真金

高达95℃真正耐高温的双功能酶

Volcano3G^®热稳定性高达95℃。在45~95℃温度范围依然保持高效的RNA逆转录和DNA扩增效率。较高的逆转录温度有助于减少靶基因中形成的RNA二级结构，提高引物特异性，从而提高扩增效率。

实验组：Volcano3G^®、供应商B和供应商C试剂，于45~95℃加热15min后，用于SCV2为样本的RT-qPCR检测，得到Cq(实验组)。

对照组：以SCV2为样本，分别使用Volcano3G^®、供应商B和供应商C试剂进行扩增检测，得到Cq(对照组)。

根据Cq(对照组)- Cq(实验组)得到的ΔCq值，可以看出供应商B和供应商C(绿色、橙色)经过高温处理后，增加的ΔCq表明在恒定模板量前提下发生延迟或没有扩增，而Volcano3G^®(黑色)经过高温后依然保持高效酶活性，具有更优的热稳定性。

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